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犬心房颤动模型缝隙连接蛋白40、45与心肌纤维化的相关性

         

摘要

目的心房颤动(房颤)的发生及维持机制与心房结构重构和电重构有关。缝隙连接蛋白(connexin,Cx)是心肌闰盘的重要组成结构。一旦Cx出现重构,可影响心肌细胞电传导的极性,出现传导阻滞或折返,引发心律失常。实验通过快速心房起搏建立房颤模型,观察其对心房Cx40和Cx45及心房心肌纤维化的影响,并对两者相关性进行研究。方法 16只健康杂种犬随机分为模型组和对照组,2组犬均在X线下置入心房"J"型电极于右心耳,模型组予以400次/min快速起搏,而对照组维持窦性心律。连续起搏10周,分别在2、4、6、8周检测肢导联心电图。对于10周后未出现房颤的犬予以房颤诱发。实验结束后,取左心房组织制备心肌组织切片。Masson染色观察心房心肌胶原改变,电镜观察心房心肌超微结构及闰盘改变,放射免疫法测定血清中Ⅲ型前胶原氨基端肽和Ⅳ型胶原,免疫组化法检测Cx40及Cx45的表达。结果模型组在快速起搏10周后均未出现自发性房颤,但其中有2只犬分别出现心房扑动和房性早搏,模型组和对照组予以Burst刺激后,模型组房颤诱发率可达66.7%,而对照组均正常。与对照组相比,模型组心房心肌胶原容积分数(collagen volumefraction,CVF)增加(P<0.05),尤以心内膜和心房肌细胞间质纤维化明显。电镜下,模型组心房肌细胞超微结构可见肌纤维紊乱、断裂,胶原纤维增生,闰盘结构扭曲、扩张,部分闰盘缝隙消失。模型组血清中Ⅲ型前胶原氨基端肽和Ⅳ型胶原水平较对照组显著增高(P<0.05);模型组心房心肌Cx40表达较对照组增加(P<0.05),而Cx45蛋白改变二组差异无统计学意义(P>0.05)。将心房心肌组织CVF与Cx40行相关性分析,结果显示CVF与Cx40呈正相关(r=0.671)。结论犬心房快速起搏能诱导左心房组织心肌纤维化和Cx40表达增加,但对Cx45无影响,同时发现Cx40的改变程度受心房心肌纤维化程度的影响。

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