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首页> 中文期刊> 《中华心血管病杂志》 >辛伐他汀抑制人外周血单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2表达

辛伐他汀抑制人外周血单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2表达

         
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目的观察辛伐他汀对人外周血单核巨噬细胞脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）表达的影响,并探讨其调控机制。方法分离培养人外周血单核巨噬细胞,实验分为脂多糖（LPS）组、辛伐他汀组和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）干预组。LPS组:分别用不同浓度（0、1、10、10~2、10~3和10~4ng/ml）的LPS与细胞共同孵育6 h,观察不同浓度的辛伐他汀对LPS诱导的Lp-PLA~2 mRNA和蛋白表达的影响;并用1 μg/ml的LPS与细胞孵育不同时间（0、6、12、24和48 h）,观察辛伐他汀作用不同时间对LPS诱导的Lp-PLA2 mRNA和蛋白表达的影响。辛伐他汀组:1 μg/ml的LPS+不同浓度的辛伐他汀(10-2～10-7mmol/L)与单核巨噬细胞共同孵育24 h,1μg/ml LPS+10-3mmol/L的辛伐他汀与单核巨噬细胞孵育不同时间（0、6、12、24和48 h）,观察辛伐他汀对LPS诱导的Lp-PLA2mRNA和蛋白表达及酶活性的影响。MAPK组:分别用10 μmoL/L的p38抑制剂SB203580、20μmol/L的ERK抑制剂U0126和20μmol/L的JNK抑制剂SP600125预处理30 min后,将单核巨噬细胞与1μg/ml的LPS共同孵育24 h,观察MAPK信号通路在LPS介导的Lp-PLA2表达中的作用。逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测Lp-PLA2mRNA表达,比色法测定酶活性,Western blot方法检测Lp-PLA2蛋白表达以及p38-MAPK蛋白及磷酸化水平。结果 （1）0.1μg/ml的LPS刺激6 h即可显著增加单核巨噬细胞Lp-PLA-2 mRNA和蛋白的表达及其酶活性,并且随LPS浓度的增加和刺激时间的延长,该作用增强。（2）辛伐他汀可以明显抑制LPS诱导的Lp-PLA2的表达增加,并且降低酶活性,该作用呈浓度及时间依赖性。（3）辛伐他汀抑制LPS诱导的p38MAPK蛋白活化,p38MAPK的抑制剂SB203580可以完全阻断LPS介导的Lp-PLA2蛋白表达增加,与辛伐他汀作用相似。而MEK1/2的抑制剂U0126和JNK的抑制剂SP600125对LPS介导的Lp-PLA2蛋白表达的增加没有影响。结论在培养的人外周血单核巨噬细胞中,辛伐他汀可以明显抑制LPS诱导的Lp-PLA-2mRNA和蛋白表达,降低Lp-PLA2酶活性,该作用至少部分由抑制p38MAPK信号转导通路介导。

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