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犬急性心肌缺血早期心肌葡萄糖、脂肪酸代谢相关酶变化的初步研究

         

摘要

目的探讨急性心肌缺血早期,心肌葡萄糖、脂肪酸代谢相关酶信使核糖核酸(mRNA)及蛋白表达的变化。方法采用12只美国比格犬,分为对照组(假手术组)、心肌缺血组,缺血组分为心肌缺血20min组、心肌缺血40min组2个亚组,分别取非缺血区、缺血区心肌组织样品各1份。应用实时定量PCR(SYBRGreenRT-PCR)方法,测定磷酸果糖激酶(PFK)、甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶(GAPDH)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、链乙酰辅酶-A-脱氢酶(MCAD)、心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)等基因mRNA的表达量。应用免疫组织化学检测GLUT1的表达。应用TUNEL阳性细胞计数法检测心肌细胞凋亡程度。结果(1)与对照组比较,缺血组mRNA表达明显增加的基因有GLUT1(P=0.044);mRNA有增加趋势的基因是PFK(P=0.065)。mRNA表达明显降低的基因有H-FABP(P=0.008)。(2)心肌缺血20min与40min组之间的比较发现,在缺血40min组心脏脂肪酸结合蛋白mRNA的表达呈下降的趋势,GLUT1、GLUT4、PFK和MCAD呈上升状态,但差异无统计学意义。(3)心肌缺血20min与40min组GLUT1的免疫组织化学检测结果都有阳性表达。(4)TUNEL阳性细胞计数法测得阳性细胞数,缺血组的平均值均高于假手术组,假手术组为(6.4±0.9)%,缺血20min组(28.0±3.7)%(P=0.008),缺血40min组(38.4±1.9)%(P=0.008)。结论即使是在急性心肌细胞缺血早期,心肌葡萄糖、脂肪酸代谢相关酶mRNA及蛋白的表达都有改变,这些酶mRNA表达的增减与无氧糖代谢的增强可能关系密切。

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