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lncRNA RGMB-AS1在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

         

摘要

目的探讨长链非编码RNA RGMB-AS1在卵巢癌组织和细胞系中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法GEPIA数据库分析RGMB-AS1表达水平与卵巢癌患者生存期的关系。采用qRT-PCR技术检测RGMB-AS1在卵巢癌组织及其癌旁组织、卵巢癌细胞系(OC3、A2780、SKOV-3、HO-8910)和正常卵巢上皮细胞系IOSE80中的表达。利用Lipofectamine 3000将阴性对照质粒(NC组)和RGMB-AS1质粒(RGMB-AS1组)分别转染至RGMB-AS1表达最少的细胞系。CCK-8法和细胞划痕愈合实验检测各组细胞的增殖活力和迁移能力。利用生物信息学方法预测和双荧光素酶活性报告基因实验验证RGMB-AS1的靶向基因。qRT-PCR和Western blot法检测RGMB-AS1靶向基因的表达。结果RGMB-AS1低表达的患者总生存期明显低于RGMB-AS1高表达患者(P<0.01)。RGMB-AS1在卵巢癌组织中的相对表达量(1.51±0.41)明显低于癌旁组织(5.28±0.63),差异有统计学意义(P<0.01)。卵巢癌细胞系(OC3、A2780、SKOV-3、HO-8910)中RGMB-AS1的表达量(0.56±0.07、0.19±0.03、0.71±0.03、0.40±0.05)均低于IOSE80细胞(1.04±0.12)(P均<0.05),RGMB-AS1相对表达量最少的细胞系是A2780细胞(P<0.01)。与NC组相比,RGMB-AS1组A2780细胞的增殖活力显著下降(P<0.05)、细胞迁移率显著下降(P<0.01)。RGMB-AS1与miR-1254存在靶向关系(P<0.01)。过表达RGMB-AS1导致A2780细胞中miR-1254表达显著下降(P<0.01),SFRP1基因表达显著增加(P<0.01),Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达降低(P<0.01)。结论RGMB-AS1在卵巢癌组织和细胞系中均呈低表达,RGMB-AS1通过靶向调节miR-1254/SFRP1分子轴,抑制卵巢癌A2780细胞的增殖活力和迁移能力。

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