一种新型抗HIV-1药物筛选方法的建立

冯婷婷; 胡华; 秦爱兰; 孙蔚; 吴南屏; 甘建和

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一种新型抗HIV-1药物筛选方法的建立

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目的用细胞共培养和流式细胞仪检测建立新型抗HIV-1药物筛选方法, 并判断这种方法在筛选抗HIV-1药物中的应用前景。方法把JLTRG细胞和H9/HTLV-ⅢB细胞按照不同比例共培养24, 48, 72和96 h。在荧光显微镜下观察细胞绿色荧光强度和密度, 同时用流式细胞仪测定绿色荧光的表达, 并确定培养体系中最佳细胞比例和培养时间。通过选出的最佳条件结合药物半衰期检测恩夫韦肽（T20）和依非韦伦（EFV）的有效性及药物半数抑制量（IC50）。采用HIV-1 P24抗原荧光定量PCR法检测病毒载量, 并采用Spearman秩相关性分析法判断其与药物浓度及平均荧光强度之间的相关性。结果实验结果显示, JLTRG细胞与H9/HTLV-ⅢB细胞按照10∶1的细胞数量比例共培养72 h为最佳培养比例和时间。以T20和EFV对共培养体系进行验证, 结果显示随着T20和EFV浓度的改变, 共培养体系中JLTRG细胞感染HIV-1的程度不同, 其IC50分别为10 nmol/L和5 nmol/L。T20和EFV药物浓度与平均荧光强度以及病毒载量呈负相关（r=-1, -0.986和-1, -1, P＆0.01）;平均荧光强度与病毒载量呈正相关（r=0.986和1, P＆0.01）。结论本研究建立的新型抗HIV-1药物筛选方法具有耗时短、操作方便等优点, 可为抗HIV-1药物的筛选提供新的选择。

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来源
《中华临床感染病杂志》 |2014年第4期||共页
作者
冯婷婷; 胡华; 秦爱兰; 孙蔚; 吴南屏; 甘建和;
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作者单位

苏州大学附属第一医院感染病科;

苏州大学附属第二医院神经内科苏州大学附属第一医院感染病科;

浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室苏州大学附属第一医院感染病科;

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正文语种 chi
中图分类获得性免疫缺陷综合征（AIDS艾滋病）;
关键词
抗HIV药; 药物筛选试验; 流式细胞术; 逆转录聚合酶链反应; 半数抑制浓度;

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