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联合运用Triton X-100和多聚甲醛改善血液肿瘤骨髓标本荧光原位杂交检测质量

         

摘要

目的 通过联合运用Triton X-100和多聚甲醛(PFA)处理玻片,改善血液肿瘤骨髓标本荧光原位杂交(FISH)检测质量.方法 42例血液肿瘤患者骨髓标本玻片,在常规FISH流程中,实验组增加Triton X-100/4%PFA预处理步骤,对照组按照常规步骤进行.配对比较实验组与对照组中未见杂交信号细胞数和阳性细胞比例.当实验组与对照组结果 不一致时,骨髓增生异常综合征(MDS)标本通过扩大计数范围验证准确性,多发性骨髓瘤(MM)标本采用荧光免疫表型结合间期原位杂交(FICTION)检测验证准确性.结果 与对照组相比,实验组杂交区域非特异性荧光信号减少,背景干净,细胞核内探针信号更清晰,FISH检测成功率达100%.实验组中未见杂交信号的细胞比例为(4.30±3.30)%,对照组为(8.04±5.45)%,二者配对差值(实验组-对照组)为(-3.74±4.27)%,实验组未见杂交信号的细胞比例低于对照组(P<0.001).实验组与对照组判读结果 一致的132个信号位点中,实验组的阳性细胞比例为(82.16±23.89)%,对照组为(77.10±23.56)%,二者配对差值(实验组-对照组)为(5.06±10.08)%,实验组阳性细胞比例高于对照组(P<0.001).此外,实验组与对照组的判读结果 不一致的5个检测位点,验证结果 与实验组结果 一致.结论 联合运用Triton X-100/4%PFA能够提高骨髓标本间期FISH检测成功率和阳性位点检出率.

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