Myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响

缪世琛; 屈舒婷; 陆颖; 唐啸; 任梁梁; 顾建兰

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Myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响

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目的:构建带myc/his标签的pcDNA3.1/TDP-43及其截断体质粒,探讨myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响.方法:采用PCR法扩增TDP-43基因及其各截断体,将扩增产物和载体pcDNA3.1双酶切后回收,连接载体和目的片段,获得重组质粒.在HEK-293FT细胞中转染pcDNA3.1/TDP-43·myc·his及其截断体质粒,Western印迹法检测相关蛋白的表达.TDP-43或siTDP-43和tau迷你基因SI9/SILO共转,RT-PCR检测TDP-43对tau外显子10可变剪接的影响.结果:成功构建了pcDNA3.1/TDP-43·myc·his全长及各截断体质粒,并在HEK-293FT细胞中检测到其蛋白表达.Myc/his-TDP-43融合蛋白可呈剂量依赖性促进4R-tau的表达(P＜0.05或0.01).结论:Myc/his-TDP-43融合蛋白可促进4R-tau的表达,携带myc/his标签不影响TDP-43对tau外显子10可变剪接的促进作用,为后续研究奠定了基础.

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来源
《中国临床医学》 |2018年第4期|568-572|共5页
作者
缪世琛; 屈舒婷; 陆颖; 唐啸; 任梁梁; 顾建兰;
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作者单位

南通大学医学院,南通226001;

南通大学医学院,南通226001;

南通大学医学院,南通226001;

南通大学医学院,南通226001;

南通大学医学院,南通226001;

南通大学医学院,南通226001;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
反式激活反应DNA结合蛋白; tau蛋白; 可变剪接; 阿尔茨海默病;

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