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受控凋亡素基因逆转录病毒载体诱导人肝癌细胞凋亡

         

摘要

目的:构建受控重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察受四环素调控的凋亡素基因的表达对人肝癌细胞的影响.方法:构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3.调节载体pRevTet-Off和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,取其病毒上清液依次感染人肝癌细胞系HepG2,以四环素调控凋亡素基因在HepG2/Off-VP3细胞中的表达,以流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功;经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因在HepG2细胞中得到了表达;HepG2/Off-VP3-8细胞在无四环素培养环境中凋亡率明显高于在1 μg/ml四环素环境中的细胞凋亡率(P<0.05).结论:凋亡素基因经RevTet系统导入人肝癌细胞HepG2后,可在四环素调控下表达凋亡素并诱导HepG2细胞凋亡.

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