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TNFAIP1对RhoA的泛素化调节在黑色素瘤进展中的作用

         
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目的探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白1(TNFAIP1)介导的RhoA泛素化在黑色素瘤增殖和侵袭中的作用。方法进行生物信息学分析以检测黑色素瘤中TNFAIP1和RhoA的表达,然后测定黑色素瘤患者的临床组织的表达。分别通过RT-qPCR和蛋白质印迹测定评估基因或蛋白质的表达。体外构建TNFAIP1和或RhoA过表达的人皮肤黑色素瘤细胞系WM2664和A2058模型。细胞增殖和侵袭分别通过集落形成、CCK-8和Transwell测定进行研究。将表达TNFAIP1和Ub-K48的质粒共转染到处理过的黑色素瘤细胞中,同时进行免疫沉淀测定以确定TNFAIP1和RhoA之间的相互作用。建立体内模型以确认TNFAIP1和RhoA对肿瘤生长和转移的影响。结果与癌旁正常组织相比,肿瘤组织中TNFAIP1表达显著降低(P<0.01)和RhoA表达显著升高(P<0.01)。TNFAIP1高表达的黑色素瘤患者预后良好,而具有RhoA高表达的黑色素瘤患者预后不良。在体外,TNFAIP1的过表达显著抑制黑色素瘤细胞的增殖和侵袭。TNFAIP1介导K48连接的RhoA泛素化以促进其降解。进一步的救援实验发现,RhoA过表达在体内和体外显著抑制了TNFAIP1过度表达在黑色素瘤增殖和侵袭中的调节作用。结论TNFAIP1在黑色素瘤中发挥肿瘤抑制作用,其通过诱导RhoA泛素化抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。

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