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Tet1蛋白对HEK293T细胞增殖、周期及凋亡的影响

         
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摘要

目的 构建可诱导Tet1CD过表达的稳转细胞系,探究Tet1蛋白对细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法 构建重组质粒pTRE-Tight_Tet1CD_IRES_RFP_RPBSA_M2rtTA_Puro,然后与表达转座酶的"睡美人"质粒通过脂质体法共同转染到HEK 293T细胞,通过嘌呤霉素筛选和多西环素诱导构建诱导表达型的Tet1CD稳转细胞系293T(Tet1CD).通过Western blot检测Tet1蛋白的表达;通过DNA dot blot检测细胞基因组中5hmC的含量,通过流式细胞术检测Tet1CD蛋白对细胞周期和凋亡的影响;通过细胞计数检测Tet1CD蛋白对细胞增殖的影响.结果 成功建立了可诱导Tet1CD过表达的HEK293T细胞系293T(Tet1CD);Western blot结果显示诱导后细胞内Tet1CD蛋白表达上升;DNA dot blot结果显示过表达Tet1CD蛋白细胞内5hmC含量升高;流式细胞术结果显示,Tet1CD过表达促进了细胞凋亡(P<0.05)及增加G2时期细胞比例(P<0.05);细胞计数结果显示,Tet1CD过表达抑制细胞增殖(P<0.0001).结论 Tet1蛋白可能通过促进细胞凋亡及阻滞细胞周期最终抑制细胞增殖.

著录项

  • 来源
    《中国比较医学杂志》 |2020年第6期|69-75|共7页
  • 作者

    莫晶; 杨红兰; 刘含; 金皎; 范安然; 张鹏; 周艳华; 舒莉萍;

  • 作者单位

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    贵州医科大学附属医院儿科 贵阳 550004;

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    贵州医科大学附属医院儿科 贵阳 550004;

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

    贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室 贵州省再生医学重点实验室 贵州医科大学免疫教研室 贵阳 550004;

    中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室 组织工程与干细胞实验中心 贵阳 550004;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 实验医学、医学实验;
  • 关键词

    表观遗传; Tet蛋白; 细胞周期; 细胞凋亡; 细胞增殖;

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