泼尼松龙通过抑制TAK1诱导成骨细胞凋亡的实验研究

左斌; 邹凯; 车彪; 喻忠斌

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目的观察泼尼松龙通过抑制转化生长因子β激活激酶1(TAK1)表达对成骨细胞凋亡的影响.方法 2017年2月-2017年7月于长江航运总医院实验室进行实验,将M3T3-E1成骨细胞经原代培养后传代培养,将细胞分为3组,A组(正常组)、B组(阴性转染+泼尼松龙处理组)、C组(TAK1 siRNA转染+泼尼松龙处理组),采用碱性磷酸酶(ALP)染色和钙结节染色评估成骨细胞分化能力的变化;采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞内磷酸化(p)-TAK1、TAK1、磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、JNK蛋白表达;MTT法检测M3T3-E1细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡变化.结果与A组比较,B、C组细胞逐渐发生破裂,细胞数量逐渐减少,细胞内钙结节数量逐渐减少;B组细胞出现破碎、形态发生改变,C组破碎细胞数量明显增加.p-TAK1、p-JNK蛋白表达量A组>B组>C组(F/P=51.624/0.000、21.163/0.000);A、B、C 3组细胞抑制率均随着时间的延长,细胞增值率呈现逐渐上升的趋势,其中48 h受抑制更显著.在12 h时,A组细胞抑制率明显高于B组和C组(q=5.093、5.821,P均<0.05),在24 h、48 h、72 h时,细胞抑制率A组>B组>C组(F/P=74.880/0.000、117.081/0.000、116.019/0.000);3组处于G2期细胞比例C组>B组>A组(F/P=21.254/0.000),处于S期细胞比例C组B组>A组(F/P=362.449/0.000).结论沉默TAK1表达后能够增强泼尼松龙诱导成骨细胞凋亡的作用,可能与JNK信号通路相关.

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来源
《疑难病杂志》 |2019年第6期|610-615|共6页
作者
左斌; 邹凯; 车彪; 喻忠斌;
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作者单位

430010 武汉,长江航运总医院骨科;

430010 武汉,长江航运总医院骨科;

430010 武汉,长江航运总医院骨科;

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正文语种 chi
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关键词
转化生长因子β激活激酶1; 泼尼松龙; 成骨细胞; 细胞凋亡;

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