柯萨奇病毒B组3型中国分离株VP1基因真核表达系统的克隆

田野; 钟照华; 赵铁强; 黄建林; 安毅; 唐伟; 沈景霞; 钟学宽; 孟繁超; 黄永麟; 鲁凤民; 叶鸿瑁

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目的探讨构建柯萨奇病毒Ｂ组３型（ＣＶＢ３）基因疫苗的可行性。方法应用逆转录ＰＣＲ技术扩增ＣＶＢ３中国分离株ＶＰ１基因，通过ＴＡ克隆法构建ｐＣＲ２．１－ＣＶＢ３ＶＰ１，将ＣＶＢ３ＶＰ１亚克隆至真核表达载体ｐＣＥＰ４，构建真核表达系统ｐＣＥＰ４－ＣＶＢ３ＶＰ１，并进行酶切和测序鉴定。结果发现ＣＶＢ３的中国分离株与Ｎａｎｃｙ株的ＶＰ１基因基本一致，均编码２９３个氨基酸，其中有５９处核苷酸存在变异，但仅改变了１０处氨基酸编码，证实克隆的片段为ＣＶＢ３ＶＰ１基因，表达载体为ｐＣＥＰ４。结论实验成功地构建了ＣＶＢ３中国分离株的真核表达系统ｐＣＥＰ４－ＣＶＢ３ＶＰ１。

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来源
《中国地方病学杂志》 |1999年第3期|169-172|共4页
作者
田野; 钟照华; 赵铁强; 黄建林; 安毅; 唐伟; 沈景霞; 钟学宽; 孟繁超; 黄永麟; 鲁凤民; 叶鸿瑁;
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作者单位

哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;

哈尔滨医科大学基础医学院;

哈尔滨工业大学;

北京医科大学第三临床医学院;

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正文语种 chi
中图分类 R373.23;
关键词
VP1基因; 真核表达系统; 柯萨奇B病毒; 克隆;

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