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多重聚合酶链反应检测流感嗜血杆菌

         
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目的建立检测流感嗜血杆菌的多重聚合酶链反应（M-PCR）方法。方法合成扩增流感嗜血杆菌编码P6外膜蛋白基因的引物（Hi）,鉴定流感嗜血杆菌种特异性;合成扩增流感嗜血杆菌编码荚膜基因的引物（Hi-cap）。鉴定菌株是否具有荚膜;设计并合成6对扩增流感嗜血杆菌不同血清型（荚膜型）编码基因的引物（Hia～Hif）,鉴定菌株的血清型,以其他呼吸道常见病原体菌株做对照,应用M-PCR方法对200株临床分离的疑似流感嗜血杆菌菌株进行鉴定和血清分型。结果M-PCR方法检测流感嗜血杆菌具有高度的敏感性和特异性。对照菌株应用种（Hi）、荚膜（Hi-cap）和荚膜型（Hia～Hif）特异引物没有扩增出DNA片段。M-PCR方法检测DNA的最低检测量为0.935 pg。对临床分离的200株疑似流感嗜血杆菌鉴定,189株为流感嗜血杆菌,与API（?）NH鉴定结果一致。其中1株具有荚膜,为f血清型,与玻片凝集法鉴定结果一致。结论M-PCR方法检测流感嗜血杆菌具有较高的敏感性和特异性,可用于流感嗜血杆菌感染病例标本的快速检测和病例诊断。

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