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苦参碱对体外人Tenon囊成纤维细胞的增生抑制及凋亡促进作用

         

摘要

cqvip:目的研究苦参碱对体外培养人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增生和凋亡过程的影响。方法复苏冻存的HTFs后进行培养、传代,取第3~4代细胞进行实验。用终质量浓度梯度为0、0.3、0.6、0.9 g/L苦参碱作用于体外培养的HTFs 24~72 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测HTFs增生情况;采用流式细胞术检测HTFs的凋亡情况;采用Western blot法、实时荧光定量PCR法检测凋亡相关转录因子caspase-3的表达情况。结果在梯度质量浓度苦参碱的作用下,HTFs的增生被抑制,且随时间的延长和质量浓度的增加,抑制效果更明显,差异均有统计学意义(F浓度=1 019.51,P=0.00;F时间=5 848.66,P=0.00;F交互作用=147.45,P=0.00)。0、0.3、0.6和0.9 g/L苦参碱作用后,HTFs的早期凋亡率分别为(2.68±0.30)%、(5.08±0.47)%、(6.97±0.69)%和(10.30±1.20)%,caspase-3蛋白表达的灰度值分别为1.00±0.13、1.90±0.19、2.50±0.30和2.67±0.30,caspase-3 mRNA的相对表达量分别为0.98±0.12、2.01±0.34、6.15±0.60和11.40±1.12,总体比较差异均有统计学意义(F=55.74、66.01、154.50,均P<0.01),随着苦参碱质量浓度的升高,HTFs的早期凋亡率明显升高,caspase-3蛋白、caspase-3 mRNA的相对表达量明显升高,各质量浓度组间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论苦参碱可抑制体外培养HTFs的增生,并呈剂量及时间依赖性;苦参碱可促进HTFs凋亡。

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