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白细胞介素-15及树突状细胞对细胞因子诱导的杀伤细胞表型及功能的影响

         
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目的观察白细胞介素-15（IL-15）和树突状细胞（DC）对细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）的免疫表型及细胞毒性的影响。方法体外培养C57BL/6小鼠脾脏单核细胞,利用干扰素-γ（IFN-γ）、IL-2和CD3抗体刺激诱导CIK细胞,采集小鼠骨髓单核细胞,诱导产生DC。在CIK诱导过程中分别予以IL-15、DC或两者共同刺激,获得CIK、IL-15-CIK、DC-CIK、DC/IL-15-CIK细胞。通过流式细胞术（FCM）鉴定各组CIK细胞中CD3+CD8+和CD3+NK1.1+表达,乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测其对肝癌Hepal-6细胞的细胞毒性。结果体外刺激前C57BL/6小鼠脾脏单核细胞中CD3+CD8+和CD3+NK1.1+阳性细胞的比例分别为（12.3±2.1）%和（1.1±0.5）%。体外培养14 d后,CIK、IL-15-CIK、DC-CIK和DC/IL-15-CIK组的CD3+CD8+细胞比例分别为（18.8±2.4）%、（22.1±2.0）%、（28.2±2.6）%和（34.7±2.3）%;CD3+NK1.1+细胞比例分别为（17.1±2.6）%、（18.9±3.4）%、（22.5.±1.5）%和（25.9±1.8）%。其中DC处理组和IL-15联合DC处理组与单纯CIK对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。在2.5:1.0~20.0:1.0的效靶比范围内,DC-CIK和DC/IL-15-CIK细胞对肝癌细胞的杀伤率显著高于CIK细胞对照组（P＜0.01）,在效靶比为20.0:1.0时,DC-CIK和DC/IL-15-CIK细胞对Hepa1-6肝癌细胞杀伤率分别为（54.9±3.1）%和（58.8±4.3）%。结论 IL-15和骨髓源性DC均可增加CIK细胞中CD3+CD8+和CD3+NK1.1+阳性细胞比例,且两者具有明显的叠加效应。DC刺激增加CIK细胞抗肿瘤细胞的活性,IL-15作用下DC-CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性进一步增强。

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