川乌提取物对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响及其机制

程鑫; 胥雄飞; 孙晓磊; 刘勇

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目的探讨川乌提取物对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖和凋亡的影响及其机制。方法分别用2.5 g/L（AR 2.5 g/L组）、5.0 g/L（AR 5.0 g/L组）和7.5 g/L（AR 7.5 g/L组）川乌提取物处理HUVECs（购自中国科学院上海细胞库）,对照组（Con）未行川乌提取物处理。将微小RNA（miRNA,miR）-NC（miR-NC组）、miR-589（miR-589组）、anti-miR-NC（anti-miR-NC组）和anti-miR-589（anti-miR-589组）分别转染至HUVECs中;将anti-miR-NC、anti-miR-589、pcDNA3.1、pcDNA3.1-蛋白激酶B1（Akt1）转染至HUVECs细胞后用5.0 g/L的川乌提取物处理,分别标记为AR 5.0 g/L+anti-miR-NC组、AR 5.0 g/L+anti-miR-589组、AR 5.0 g/L+pcDNA3.1组和AR 5.0 g/L+pcDNA3.1-Akt1组。噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-589的表达水平;蛋白质印迹法（Western blot）检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-589和Akt1的靶向关系。两组间比较采用t检验。多组间比较采用SNK-q检验。结果不同浓度川乌提取物组HUVECs细胞增殖活性、细胞周期蛋白（Cyclin） D1、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）和miR-589表达均显著低于Con组（F=107.822、86.321、136.234,P＆0.05）,凋亡率、p21和bcl-2相关X蛋白（bax）蛋白表达显著高于Con组（F=95.875、124.365、107.541,P＆0.05）。miR-589组HUVECs增殖活性、Cyclin D1和bcl-2蛋白表达显著高于miR-NC组（t=15.358、31.109、8.971,P＆0.05）,凋亡率、p21和bax蛋白表达显著低于miR-NC组（t=23.124、21.175、11.364,P＆0.05）,抑制miR-589表达可逆转川乌提取物对HUVECs增殖和凋亡的作用。miR-589可靶向调控Akt1的表达。结论川乌提取物可抑制HUVECs增殖并促进细胞凋亡,可能与调控miR-589/Akt1有关。

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来源
《中华实验外科杂志》 |2020年第5期||共页
作者
程鑫; 胥雄飞; 孙晓磊; 刘勇;
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作者单位

1. 西南医科大学附属医院血管外科 2. 雅安职业技术学院附属医院外三科;

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正文语种 chi
中图分类中药药理学;
关键词
川乌; 人脐静脉内皮细胞; 增殖; 脱噬作用; 机制;

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