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FTA-DNA直接提取法的研究与应用

         

摘要

目的 建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法.方法 取直径1.2mmFFA卡血样,分别用FTA-DNA直接提取法及FTA(R)常规提取方法提取DNA,AB-IdentifilerTM试剂盒分别进行10 μl和25μl体系检测比较,并筛选批量FTA卡血样DNA自动化提取程序.结果 200份FFA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板,25μl体系PCR-STR检测,分型结果均良好.10μl体系检测,FTA-DNA直接提取法优于FFA(R)常规提取方法,图谱RFU值为1000~2000,采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳;采用FFA(R)常规提取方法检测,图谱RFU值100~2000,小片段优先扩增现象明显,且有19%的样本出现丢峰现象,采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显.经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10μl体系检测本2万余份FTA卡采集的血样,均获得16个STR基因座DNA分型结果.结论 本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA(R)卡血样自动化DNA建库.

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