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首页> 中文期刊> 《中国老年学杂志》 >白杨素对HBx诱导肝癌细胞增殖、凋亡及miR-103/PTEN通路的影响

白杨素对HBx诱导肝癌细胞增殖、凋亡及miR-103/PTEN通路的影响

         
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目的 探讨白杨素对乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)诱导肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的抗肿瘤作用机制.方法 实验分为HepG2组(HepG2细胞),HBx-HepG2组、20μmol/L白杨素组、40μmol/L白杨素组、80μmol/L白杨素组,CCK-8法及平板克隆法检测细胞增殖能力,采用Hoechst33258荧光染色及流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过Western印迹检测增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3及磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)蛋白水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞miR-103表达水平.结果 与HepG2组相比,HBx-HepG2组细胞48 h OD值显著升高(P0.05),20、40、80μmol/L白杨素组对HBx-HepG2细胞增殖抑制率显著增加,且两两比较差异有统计学意义(P<0.05),因此后续选择20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白杨素处理48 h.与HepG2组细胞克隆数目相比,HBx-HepG2组显著增加(P<0.05);与HBx-HepG2组相比,20、40、80μmol/L白杨素组(P<0.05).与HepG2组、HBx-HepG2组相比,20、40、80μmol/L白杨素组细胞形态变化显著,发生核固缩、核裂变等改变,正常形态细胞明显较少,凋亡细胞明显增加,与HepG2组细胞凋亡率相比,HBx-HepG2组显著降低(P<0.05),20、40、80μmol/L白杨素组细胞凋亡率依次升高(P<0.05).与HepG2组相比,HBx-HepG2组Ki67蛋白表达显著升高(P<0.05),Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),20、40、80μmol/L白杨素组Ki67蛋白表达依次下降(P<0.05),Caspase-3蛋白表达依次升高(P<0.05).与HepG2组相比,HBxHepG2组miR-103表达显著升高(P<0.05),PTEN mRNA、PTEN蛋白表达显著降低(P<0.05),20、40、80μmol/L白杨素组miR-103表达依次降低(P<0.05),PTEN mRNA、PTEN蛋白表达依次升高(P<0.05).结论 白杨素可能通过miR-103/PTEN轴抑制HBx-HepG2细胞增殖,促进其凋亡.

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