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MCP-1、TGF-β1和TLR4蛋白表达与COPD大鼠肺动脉平滑肌细胞功能的关系

         

摘要

目的 探究单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、转化生长因子(TGF)-β1在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中的表达情况及与Toll样受体(TLR)4信号通路的相关性.方法 选取36只Wistar大鼠(SPF级),根据随机数字表法将其分为脂多糖(LPS)组、TLR4抑制剂组、LPS+TLR4抑制剂组和对照组各9只.前3组为模型组,经气道注入LPS、香烟烟熏等步骤制备COPD大鼠模型.分离并原代培养各组大鼠远端PASMCs,LPS组采用LPS(终质量浓度1 ml/L)干预细胞,TLR4抑制剂组采用TAK-242(终浓度1μmol/L)干预细胞,LPS+TLR4抑制剂组采用LPS(终质量浓度1 ml/L)+TAK-242(终浓度1μmol/L)干预细胞,对照组不作任何处理.Western印迹检测各组PASMCs中TLR4蛋白含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中MCP-1、TGF-β1蛋白含量.结果 对照组肺泡完整,肺组织未见炎细胞浸润;LPS组、TLR4抑制剂组和LPS+TLR4抑制剂组肺泡破裂融成肺大泡,其间伴大量炎性细胞.经ASM-actin免疫组化染色,镜下可见胞液中大部分肌动蛋白形成棕黄色丝状物,平行于细胞长轴.各组TLR4蛋白含量由高到低依次为LPS组、LPS+TLR4抑制剂组、对照组和TLR4抑制剂组,两组间比较差异均有统计学意义(均P0.05).结论 LPS可上调COPD大鼠PASMCs中TLR4蛋白的表达,并促进MCP-1和TGF-β1的分泌.TLR4蛋白含量与MCP-1、TGF-β1水平均无相关性.

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