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半边莲提取物通过miR-20a-3p/FHIT调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭

         
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目的 探究半边莲(LCL)提取物是否通过miR-20a-3p/脆性组氨酸三联体(FHIT)调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭.方法 流式细胞仪检测细胞凋亡情况,MTT检测细胞增殖抑制率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,RT-qPCR检测miR-20a-3p、FHIT表达水平,Western印迹检测相关蛋白水平.结果 与Con组比较,LCL各组凋亡率、抑制率显著升高,细胞迁移、侵袭数目显著降低,与Con组比较,细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2水平显著降低,P21、Bcl-2相关蛋白(Bax)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)水平显著升高(P<0.05);RT-qPCR检测显示,与Con组比较,LCL 250 mg/L组SW480细胞的miR-20a-3p mRNA水平显著降低,FHIT的mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05);抑制miR-20a-3p后,SW480细胞miR-20a-3p mRNA水平显著降低,CyclinD1、Bcl-2、MMP-2蛋白水平显著降低,P21、Bax、E-cadherin蛋白水平显著升高,细胞抑制率、凋亡率显著升高,侵袭、迁移细胞数显著降低(P<0.05);过表达miR-20a-3p后,SW480细胞miR-20a-3p mRNA水平显著升高,SW480细胞CyclinD1、Bcl-2、MMP-2蛋白水平显著升高,P21、Bax、E-cadherin蛋白水平显著降低,细胞抑制率、凋亡率显著降低,侵袭、转移数目显著升高(P<0.05);荧光素酶报告基因显示,miR-20a-3p调控FHIT基因;与miR-NC组比较,miR-20a-3p组FHIT蛋白水平显著降低;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-20a-3p组FHIT蛋白水平显著升高;抑制FHIT,SW480细胞CyclinD1、Bcl-2、MMP-2蛋白水平显著升高,P21、Bax、E-cadherin蛋白水平显著降低,细胞抑制率、凋亡率显著降低,迁移、侵袭细胞数显著增多(P<0.05).结论 半边莲提取物通过miR-20a-3p/FHIT促进结直肠癌细胞凋亡,抑制其增殖、迁移、侵袭.

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