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阿霉素增强抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导HL-60细胞凋亡的作用

         
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目的观察抗死亡受体5（DR5）单克隆抗体（单抗）mDRA-6与阿霉素（Adr）对 HL-60细胞的协同杀伤作用。方法用 DR5蛋白免疫 BALB/c 小鼠,融合筛选抗 DR5杂交瘤细胞,制备抗人DR5单抗 mDRA-6;流式细胞术测定 Adr 对 HL-60细胞表面 DR5表达的影响;荧光显微镜下观察mDRA-6与 Adr 协同作用下 HL-60细胞的形态变化;MTT 法测定1μg/ml Adr 与不同浓度的 mDRA-6对 HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测 mDRA-6与 Adr 联合对 HL-60细胞 DNA 片断化的影响结果 Adr 诱导 HL-60细胞表面 DR5表达,mDRA-6作用后 HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,mDRA-6与 Adr 联用细胞形态变化更明显;mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有明显的协同杀伤作用,20 ng/ml 的 mDRA-6作用 HL-60细胞10h,细胞死亡率为9.32%,1μg/ml Adr作用 HL-60细胞10 h,细胞死亡率为17.47%,20 ng/ml mDRA-6联合1μg/ml Adr,可使 HL-60细胞死亡率增至65.06%;20 μg/ml mDRA-6与1μg/ml Adr 联合作用于 HL-60细胞3 h,DNA 琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论抗 DR5单抗 mDRA-6与 Adr 对 HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。

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