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沉默诱骗受体3提高宫颈癌Caski细胞放疗敏感性的研究

         
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目的探讨沉默诱骗受体3(DcR3)对宫颈癌Caski细胞放疗敏感性的影响。方法将宫颈癌Caski细胞分成Control组、sh-NC组(感染shRNA阴性对照)、sh-DcR3组(感染DcR3 shRNA)、RAD+sh-NC组(感染shRNA阴性对照,照射处理)、RAD+sh-DcR3组(感染DcR3 shRNA,照射处理);采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,碘化丙啶(PI)单染法测定细胞周期,膜联蛋白(Annexin)V-FITCV-FITC/PI双染法测定细胞的凋亡,Western blot测定周期蛋白p21、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)的表达变化,克隆形成试验检测放射敏感性。结果与Control组、sh-NC组比较,sh-DcR3组、RAD+sh-NC组、RAD+sh-DcR3组细胞增殖能力下降(0.41±0.05、0.39±0.03 vs.0.26±0.03、0.24±0.01、0.16±0.02),G_(0)/G_(1)期比例升高[(52.32±2.15)%、(51.88±3.62)%vs.(60.21±4.27)%、(64.83±3.51)%、(72.15±4.39)%],细胞凋亡增加[(2.84±0.21)%、(2.95±0.38)%vs.(16.54±1.26)%、(20.51±1.37)%、(29.17±2.86)%],Bax、C-caspase-3、p21表达增多,cyclin D1表达减少(P<0.05)。与sh-DcR3组、RAD+sh-NC组比较,RAD+sh-DcR3组细胞增殖能力下降(0.26±0.03、0.24±0.01 vs.0.16±0.02),G_(0)/G_(1)期比例升高[(60.21±4.27)%、(64.83±3.51)%vs.(72.15±4.39)%],细胞凋亡增加[(16.54±1.26)%、(20.51±1.37)%vs.(29.17±2.86)%],Bax、C-caspase-3、p21表达增多,cyclin D1表达减少(P<0.05)。shRNA慢病毒感染后的宫颈癌细胞放射增敏比为1.496。结论沉默DcR3可通过阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡提高宫颈癌Caski细胞的放疗敏感性。

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