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首页> 中文期刊> 《中华劳动卫生职业病杂志》 >1,4-苯醌暴露下小鼠骨髓细胞p15基因表达和甲基化状态

1,4-苯醌暴露下小鼠骨髓细胞p15基因表达和甲基化状态

         
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目的探讨1,4-苯醌（1,4-BQ）暴露下,体外原代培养的小鼠骨髓细胞中抑癌基因p15的mRNA表达及启动子区的甲基化状态。方法体外分离小鼠骨髓细胞,测定0、0.1、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L的1,4-BQ对小鼠骨髓细胞活力的影响,最终确定以0、0.1、1.0、10.0μmol/L的1,4-BQ染毒骨髓细胞24h;实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测p15基因mRNA的表达变化;重亚硫酸盐测序法（BSP）检测启动子区域CpG岛的甲基化状态。结果 1,4-BQ对小鼠骨髓细胞具有剂量依赖的毒性作用,其LC50为8.3μmol/L（95% CI:4.6～10.6μmol/L）。与对照组（100.0%）比较,10.0、20.0、40.0μmol/L 1,4-BQ染毒组小鼠的骨髓细胞生存率（35.9%、35.8%、30.5%）均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。10.0μmol/L染毒组p15 mRNA表达为对照组的43%,与对照组比较,1.0和10.0μmol/L染毒组p15基因mRNA表达量明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。BSP测序结果显示,染毒组和对照组相同,p15基因启动子区域CpG岛上56个甲基化位点仍保持非甲基化状态。结论 1,4-BQ暴露可导致原代培养的小鼠骨髓细胞中p15基因的mRNA表达量下降,但启动子区域CpG岛的甲基化状态未受影响,提示甲基化不参与1,4-BQ介导的p15基因表达下调。

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