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理中汤合四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠JNK/Beclin 1/Bcl-2信号通路相关蛋白及基因表达的影响

         
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目的观察以温补脾肾法为指导的理中汤合四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠的影响,探讨其可能的作用机制。方法制备脾肾阳型UC大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶组(SASP组)、肠胃宁组和理中汤合四神丸低、中、高剂量组,每组16只,同时设空白组16只。各给药组予相应药物灌胃,空白组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续21 d。观察大鼠结肠黏膜组织损伤情况,对结肠黏膜损伤指数(CMDI)进行评分;HE染色观察大鼠结肠组织病理变化;免疫组化和RT-qPCR分别检测大鼠结肠组织JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B蛋白和m RNA表达;Western blot检测大鼠结肠组织JNK1、p-JNK1、Bcl-2、p-Bcl-2、Beclin 1和LC3B蛋白表达,并计算LC3BⅡ/LC3BⅠ比值。结果与空白组比较,模型组大鼠CMDI评分显著升高(P<0.01),结肠组织腺体排列紊乱,黏膜层消失,有大量炎性细胞浸润,黏膜基层与基底层分界不清;结肠组织JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),p-JNK1、p-Bcl-2蛋白表达及LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著升高(P<0.01)。与模型组比较,SASP组、肠胃宁组和理中汤合四神丸中、高剂量组大鼠CMDI评分显著降低(P<0.05,P<0.01),各给药组大鼠结肠黏膜损伤减轻,炎性细胞浸润减少;理中汤合四神丸高剂量组、SASP组、胃肠宁组大鼠结肠组织JNK1、Beclin 1、Bcl-2、LC3B mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),p-JNK1、p-Bcl-2蛋白表达及LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著降低(P<0.01)。结论以温补脾肾法为指导的理中汤合四神丸可能通过抑制JNK/Beclin 1/Bcl-2信号通路的激活,降低结肠组织过度自噬,进而修复脾肾阳虚型UC大鼠结肠黏膜。

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