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大鼠肾脏汞结合金属硫蛋白的联用技术表征研究

         

摘要

通过凝胶色谱(SEC)及反相液相色谱(RPC)分别与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)联用的技术,对灌喂HgCl2大鼠的肾组织中诱导的多金属结合金属硫蛋白(MT)的结构进行表征分析.通过SEC-ICP-MS曲线上的金属信号及紫外检测的MT光谱吸收特征,可确认组织提取液中MT在色谱曲线上的位置.与对照组相比,灌喂HgCl2大鼠肾中Hg-MT的诱导量显著增加,与此同时,Cu-MT在染毒组的诱导量也相应增加,说明MT在染汞大鼠肾脏中起着对汞的解毒和对铜的调节作用.MT样品提取物经葡聚糖凝胶(G-75)柱分离纯化并用透析法脱盐后,用细内径反相色谱柱分离,进行梯度洗脱,并与ESI-MS联用,可获得总离子流色谱图及与色谱峰对应的质谱图,通过对质谱信号的解析及参考脱金属MT构型的有关报道,对汞诱导大鼠肾组织MT的不同亚型和次亚型分子结构进行推断.结果证明,在灌喂HgCl2大鼠的肾组织中存在着一系列汞结合的MT形态.

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