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不同剂量甲状旁腺素氨基端1-34片段连续刺激对SaoS-2人成骨肉瘤细胞系的影响

         

摘要

目的 观察不同剂量人甲状旁腺素氨基端 1 34片段 (hPTH1 34)连续刺激对SaoS 2人成骨肉瘤细胞系功能、信号传导的影响及机制。方法 对于对数生长期的SaoS 2细胞 ,采用 5、50、50 0和 5 0 0 0 μg/L浓度hPTH1 34连续刺激 8d。于刺激前、刺激中及刺激后 ,采用“金氏”化学法和放射免疫法测定培养液中碱性磷酸酶 (ALP)和骨钙素 (BGP)浓度 ;采用竞争蛋白结合法测定环磷酸腺苷(cAMP)浓度 ;采用逆转录 (RT) PCR对c fos基因表达水平进行半定量分析。结果 50 0 μg/LhPTH1 34刺激显著增高ALP水平 (P <0 .0 5 ,比对照组 ) ,促进成骨细胞分化。 5 0 0 0 μg/L刺激组BGP水平逐渐下降 (P值均 <0 .0 5 ,比对照组和刺激前 )。 50、50 0 μg/LhPTH1 34连续刺激组cAMP明显增高 (P值均<0 .0 5)。 5μg/L和 5 0 0 0 μg/L组cAMP无显著改变。 50、50 0 μg/L组c fos基因表达水平高于其他组。结论 hPTH1 34对成骨样细胞的影响与剂量显著相关 ,50及 50 0 μg/LhPTH1 34连续刺激显著促进成骨样细胞分化 ,增加骨骼的合成代谢。ALP、cAMP的水平及c fos基因表达对不同浓度hPTH1 34刺激的反应明显同步 ,提示hPTH1 34主要通过蛋白激酶A信号途径影响成骨细胞功能及c fos基因的表达 ,后者进一步在转录水平调节成骨细胞?

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