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肺炎克雷伯菌临床分离株aac(6′)-Ib-cr基因的检测

         

摘要

目的调查肺炎克雷伯菌临床分离株 aac(6′)-Ib-cr 基因存在情况。方法收集2006年1月至2007年9月从临床分离的337株非重复的肺炎克雷伯菌。挑选64株对庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素任何一种耐药的肺炎克雷伯菌临床分离株进行 aac(6′)-Ib-cr 基因检测,采用 PCR法检测 aac(6′)-Ib 和Ⅰ类整合酶基因(intll),通过 DNA 直接测序确定 aac(6′)-Ib-cr。抗生素 MIC 值测定采用琼脂稀释法。ESBLs 检测采用双纸片扩散法,通过接合试验检测质粒是否可以发生转移。结果 337株肺炎克雷伯菌临床分离株中,对庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的耐药率分别为19.0%(64/337)、8.3%(28/337)和16.3%(55/337)。共有24株细菌经 PCR 证实 aac(6′)-Ib 基因阳性,经测序证实全部为 aac(6′)-Ib-cr 基因,阳性率为37.5%(24/64)。24株 aac(6′)-Ib-cr 基因阳性株中,有13株对环丙沙星耐药(MIC≥2 mg/L)和11株环丙沙星敏感(MIC≤0.25~1.0mg/L)。aac(6′)-Ib-cr 基因在环丙沙星耐药菌株和环丙沙星敏感菌株中的检出率分别为54.2%(13/24)和27.5%(11/40),经 X~2检验,差异具有统计学意义(X~2=11.056,P<0.01)。24株 aac(6′)-Ib-cr 基因阳性株中,ESBLs 和 intll 基因的阳性率分别为79.2%(19/24)和91.7%(22/24)。13株 aac(6′)-Ib-cr基因阳性菌株的质粒成功转移至受体菌,以受体菌质粒 DNA 为模板进行 aac(6′)-Ib-cr 检测,13株受体菌质粒全部为 aac(6′)-Ib-cr 基因和 intl 基因阳性,全部为 ESBLs 阳性株。结论 aac(6′)-Ib-cr 基因广泛存在于肺炎克雷伯菌临床分离株中,aac(6′)-Ib-cr 可能通过Ⅰ类整合子和 ESBL 基因同时位于可转移的质粒上造成传播。

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