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首页> 中文期刊> 《肾脏病与透析肾移植杂志》 >马兜铃酸I诱导人肾小管上皮细胞转分化的作用及机制

马兜铃酸I诱导人肾小管上皮细胞转分化的作用及机制

         
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目的：探讨马兜铃酸I(Aristolochic acid I，AAI)在人类肾小管上皮细胞(HKC)转分化中的可能作用，了解AAI引起肾小管间质损害的机制。方法：将体外培养HKC细胞分为无血清对照组(C组)和AAI实验组两组，在AAI组培养液中加入不同剂量AAI；两组HKC细胞分别培养48h后，应用间接免疫荧光法检测HKC细胞角蛋白、波形蛋白和α-1平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)表达的变化；应用流式细胞技术检测表达α-SMA阳性(+)的HKC细胞百分率；采用免疫酶标技术(ELISA)检测HKC细胞上清液中转化生长因子β1(TGF β1)的表达。结果：间接免疫荧光法观察，可见不同剂量AAI处理后的HKC细胞表达角蛋白减弱，表达α-SMA及波形蛋白增强；应用流式细胞术检测，发现不同剂量AAI(10，20，40，80 μg／L)处理后，表达α-SMA(+)的HKC细胞百分率与AAI剂量呈正相关(r=0.0867，P＜0.005)；当AAI为20，40，80μg／L时，HKC细胞表达α-SMA百分率为8.6％，9.6％，13.4％，较C组(平均值为3.1％)明显增高(P＜0.05)。应用ELISA法观测AAI对HKC细胞分泌TGF β1的影响，可见C组HKC细胞有基础水平的TGFβ1分泌(21.7％ng／L)；当予一定剂量的AAI(10，20μg/L)刺激HKC细胞24h后，细胞上清液中TGFβ1水平明显升高(75.6 ng／L，65.6 ng／L vs 21.7 ng／L，P＜0.05)；当AAI浓度分别为40，80μg／L时，HKC细胞分泌TGFβ1水平则明显降低。结论：①一定浓度的AAI可诱导体外HKC细胞部分转分化；②一定浓度的AAI可刺激HKC细胞分泌TGF β1；高浓度AAI抑制HKC细胞分泌TGF β1；③AAI诱导HKC细胞转分化可能部分与TGF β1分泌增多有关，但其确切机制尚待进一步研究。%OBJFCTIVE To investigate the possible role of Aristolochic acid Ⅰ(AAI) in the phenotypic transformation of cultured hu-man renal tubular epithelial cells line(HKC) METHODOLOGY The HKC cells were divided into two groups:serum free con-trol group and AAI treatment groups with 12-48 hours' treatment of AAI at different dosages. HKC were analyzed by immunohisto-chemistry, with monoantibodies to α-smooth muscle actin(α-SMA), vimentin and cytocratin respectively. The expression of α-SMA of HKC cells was assessed by flow cytometry. The expression of transforming growth factor β(TGF β 1 ) in the supematant of HKCcells was assessed with EISA. RESULTS The expressions of vimentin and cytocratin were decreased in AAI-treated HKCcells, while α-SMA expression was increased by AAI in a dose-dependant manner( r = 0.0867, P < 0.005). The basic expressionof TGF β1 by HKC cells was 21.7 ng/L. The expression of TGF β1 in the supematant of HKC cells increased significantly whenculttured with AAI( 10,20 μg/L) (75.6,65.6 ng/L vs 21.7ng/L, P < 0.005). However, when the HKC cells were cultured withAAI at 40 or 80 μg/L, the TGF β1 levels from the supematants were markedly decreased. CONCLUSION The transdifferenti-ation of HKC may be induced by AAI in vitro. AAI may have a diphasic role on TGF β1 expression in HKC cells. AAI inducedtransdifferentiation my be partially related to the increased TGF β1 secretion.

著录项

  • 来源
    《肾脏病与透析肾移植杂志》 |2000年第3期|206-209|共4页
  • 作者

    文晓彦; 郑法雷;

  • 作者单位

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院(北京;

    100730);

    PUMC Hospital, CAMS and PUMC , Beijing 100730;

    PUMC Hospital, CAMS and PUMC , Beijing 100730;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 泌尿科学（泌尿生殖系疾病）;
  • 关键词

    马兜铃酸I 肾小管上皮细胞 细胞转分化;

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