Notch1通路活化对胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响

周星辰; 海龙; 张辰; 刘波; 李帅; 林雨; 王伟; 李涛; 杨亦寒; 程铖; 于圣平; 杨学军

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目的观察Notch1通路活化对胶质瘤干细胞（GSCs）迁移和侵袭能力的影响并探讨其潜在机制。方法将U87胶质瘤细胞置于干细胞培养基中悬浮培养,使用免疫磁珠法分选获得CD133阳性的胶质瘤细胞,免疫荧光染色检测CD133及巢蛋白鉴定GSCs。将携带Notch1抑制物核苷酸序列（shRNA-Notch1）、阴性对照核苷酸序列（shRNA-NC）的重组慢病毒转染至体外培养的U87来源的GSCs中,分别作为shRNA-Notch1组、shRNA-NC组,同时设不做处理的空白对照组,在成球后行通过荧光定量PCR检测3组细胞Notch1 mRNA的表达:Western blotting检测3组细胞Notch1、Hes1、Akt、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白的表达;Transwell细胞迁移和侵袭实验观察3组细胞迁移和侵袭能力的强弱。结果免疫荧光染色检测显示肿瘤细胞球阳性表达神经干细胞标志物CD133和巢蛋白。与shRNA-NC组和空白对照组相比,shRNA-Notch1组GSCs的Notch1 mRNA和蛋白、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白表达降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,而Akt蛋白水平没有明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。Transwell迁移及侵袭实验均显示与shRNA-NC组和空白对照组相比,shRNA-Notch1组穿膜的细胞数目降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论抑制Notch1通路活性后可能通过PI3K通路来调节GSCs的迁移和侵袭能力。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2016年第1期||共页
作者
周星辰; 海龙; 张辰; 刘波; 李帅; 林雨; 王伟; 李涛; 杨亦寒; 程铖; 于圣平; 杨学军;
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作者单位

天津医科大学总医院神经外科;

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正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
胶质瘤干细胞; Notch1; 细胞迁移; 细胞侵袭;

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