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骨髓间充质干细胞对活化的BV2小胶质细胞表型转变的影响

         
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目的采用脂多糖（LPS）刺激BV2小胶质细胞建立体外炎症模型,观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对活化的小胶质细胞分泌炎症因子、表型转变的影响。方法体外原代培养并纯化大鼠MSCs,常规培养BV2小胶质细胞。实验分PBS对照组、PBS联合MSCs处理组、LPS刺激组、LPS联合MSCs干预组,应用Transwell细胞共培养系统培养MSCs与BV2小胶质细胞（共培养比例为1:1、2×10~5个/孔）,上室接种MSCs,下室接种BV2细胞,LPS的刺激浓度为1μg/mL,作用24h后收集各组细胞培养上清及BV2小胶质细胞,Griess法检测细胞培养上清中NO的浓度;Elisa法检测细胞培养上清中炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的含量;RT-PCR、Western blotting分别检测小胶质细胞一氧化氮合酶（iNOS）、Arg-1 mRNA和蛋白的表达。结果 MSCs干预后活化BV2小胶质细胞的"阿米巴样"形态明显改善:与PBS对照组、PBS联合MSCS处理组相比,LPS刺激组细胞培养上清中NO的浓度、炎症因子TNF-α、IL-1β的含量升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LPS刺激组相比,LPS联合MSCS干预组BV2小胶质细胞分泌NO、TNF-α、IL-1β的含量降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与PBS对照组相比,PBS联合MSCS处理组、LPS刺激组BV2小胶质细胞的iNOS mRNA和蛋白表达量均升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,而Arg-1 mRNA和蛋白的表达量无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）;与LPS刺激组相比,LPS联合MSCS干预组BV2小胶质细胞iNOS mRNA和蛋白的表达降低,而Arg-1 mRNA和蛋白的表达量明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 MSCs可抑制活化小胶质细胞的炎症反应,促进小胶质细胞由M1型向M2型转变,从而发挥神经保护作用。

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