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自噬反应对大鼠创伤性颅脑损伤后神经功能的影响及机制研究

         
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目的探讨自噬反应对大鼠创伤性颅脑损伤（TBI）后神经功能修复的影响及丝裂素活化蛋白激酶家族（MAPKs）信号通路在其中的作用。方法健康雄性SD大鼠54只按随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组,每组18只;后2组大鼠采用改良Feeney法建立TBI模型,假手术组大鼠仅开骨窗不予撞击。TBI+3-MA组大鼠于造模后30 min腹腔注射3-MA（5 mg/kg）,其余2组大鼠腹腔注射等量生理盐水。造模后1、3、7 d酶联免疫吸附法检测3组大鼠血清中S100B和神经元特异性烯醇化酶（NSE）蛋白的浓度,采用改良神经功能评分（mNSS）对大鼠进行运动、感觉和反射功能检查并测定脑组织含水量;造模后3 dWesternblotting检测大鼠脑组织自噬相关因子微管相关蛋白轻链3-II（LC3-II）、自噬相关基因-1（Beclin-1）以及c-jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化JNK（p-JNK）、细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）、p-ERK1/2、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达。结果与假手术组比较,TBI组、TBI+3-MA组大鼠造模后1、3、7 d血清神经损伤标志物S100B和NSE蛋白、mNSS评分、脑组织含水量升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。TBI+3-MA组造模后3、7 d S100B和NSE蛋白,造模后1、3、7 dmNSS评分、脑组织含水量均低于TBI组,差异有统计学意义（P＜0.05）。其中造模后3 d假手术组、TBI组、TBI+3-MA组大鼠mNSS评分分别为1.10±0.27、11.76±0.35、10.71±0.33;与假手术组比较,TBI组、TBI+3-MA组大鼠造模后3 d脑组织LC3-II、Beclin-1蛋白以及JNK、P-JNK、ERK1/2、p-ERK1/2、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达上调,差异有统计学意义（P＜0.05）。与TBI组比较,TBI+3-MA组大鼠造模后3d脑组织LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白,P-JNK和P-p38MAPK蛋白表达减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论抑制自噬反应能改善颅脑损伤后的神经功能,起到神经保护作用,其机制可能是通过抑制MAPKs家族中的JNK和p38MAPK信号传导通路来实现。

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