Artemin基因修饰的骨髓间充质干细胞对多巴胺能神经元的保护作用

刘凯; 阴晓峰; 相恒伟; 邓文帅; 孙鹏

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Artemin基因修饰的骨髓间充质干细胞对多巴胺能神经元的保护作用

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目的探讨Artemin（ARTN）对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的多巴胺能神经元损伤的保护作用及对帕金森病（PD）大鼠脑内相关蛋白表达的影响。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,将携带ARTN基因的慢病毒载体转染MSCs,获得稳定表达ARTN的MSCs细胞株。应用MTT法测定细胞存活率,Hochest33258荧光染色观察凋亡细胞形态学改变,同时检测Lv-ARTN-MSCs细胞上清液对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞凋亡作用的影响。制备PD大鼠模型,按照随机数字表法分为PD组（左侧纹状体输注生理盐水5 μL）、MSCs组（左侧纹状体移植MSCs,1.0×105个/5 μL）、Lv-MSCs组（左侧纹状体移植Lv-MSCs,1.0×105个/5 μL）、Lv-ARTN-MSCs组（左侧纹状体移植Lv-ARTN-MSCs,1.0×105个/5 μL）,每组各6只;另取6只大鼠设为假手术组（以等量生理盐水代替6-OHDA,手术步骤及坐标同PD模型大鼠制备）。Western blotting检测各组大鼠纹状体酪氨酸羟化酶（TH）和多巴胺转运体（DAT）表达。结果 Lv-ARTN-MSCs组可见明显的ARTN蛋白条带。Lv-ARTN-MSCs上清液可明显拮抗6-OHDA引起的细胞存活率降低,与6-OHDA组相比,Lv-ARTN-MSCs组细胞存活率提高13.67%,差异有统计学意义（P＆0.05）。细胞移植8周后,MSCs组、LV-MSCs组、LV-ARTN-MSCs组与PD组大鼠相比,纹状体TH、DAT蛋白表达明显提高,差异有统计学意义（P＆0.05）,以LV-ARTN-MSCs组最明显。结论 ARTN作为一种分泌蛋白,可以抑制6-OHDA诱导的多巴胺能神经元损伤,推测机制为上调TH、DAT蛋白表达。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2015年第2期||共页
作者
刘凯; 阴晓峰; 相恒伟; 邓文帅; 孙鹏;
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作者单位

青岛大学医学院附属医院神经外科;

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正文语种 chi
中图分类震颤麻痹综合征;
关键词
帕金森病; 骨髓间充质干细胞; Artemin; 基因转染;

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