氧化应激条件下多巴胺能细胞自噬的变化

王岚; 沈伟; 苏艳伟

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氧化应激条件下多巴胺能细胞自噬的变化

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目的探讨多巴胺能神经元（PC12细胞）在氧化应激环境下细胞大自噬及分子伴侣介导的自噬的变化,以及其在神经元变性死亡中的作用。方法以不同浓度（20、100、500nmol/L）鱼藤酮处理PC12细胞后,采用透射电镜方法观察PC12细胞内自噬体的形态学特点;通过单丹磺酰尸胺（MDC）荧光染色、免疫印迹法检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）表达,以观察大自噬活性;通过免疫印迹法检测溶酶体相关膜蛋白2α（Lamp-2α）、热休克同源蛋白70（Hsc70）和热休克蛋白90（Hsp90）的表达,以观察分子伴侣介导的自噬。结果电镜观察显示未处理的PC12细胞自噬活性低,较少观察到自噬泡出现;鱼藤酮处理组各种不同形态的自噬泡明显增多,可观察到自噬线粒体现象,其中高浓度（500nmol/L）鱼藤酮组胞浆内出现了大量空泡状结构。MDC荧光染色显示经不同浓度鱼藤酮处理后,红色荧光逐渐增强,呈点状或团状分布。免疫印迹结果显示LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的表达逐渐增加,呈剂量依赖性;Lamp-2α及Hsc70、Hsp90的表达亦明显增多,但在不同浓度鱼藤酮处理组间差异未出现统计学意义（P＞0.05）。结论氧化应激条件下,PC12细胞内自噬活性被激活,可诱发自噬性细胞死亡的发生,其中大自噬活性的上调随着氧化应激程度加剧而不断上升,而分子伴侣介导的自噬活性则与氧化应激的程度无明显关系。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2014年第3期||共页
作者
王岚; 沈伟; 苏艳伟;
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作者单位

华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科;

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正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
氧化应激; 自噬; PC12细胞; 鱼藤酮;

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