SIRT1对激活型小胶质细胞BV-2毒性损伤PC12细胞的保护作用及机制研究

叶杰明; 刘振华; 谢惠芳; 魏继鹏; 陆伶俐; 黄燕君

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目的探讨沉默信息调控因子1（SIRT1）在激活型小胶质细胞介导PC12细胞损伤中所起的作用及相关机制。方法体外常规培养BV-2小胶质细胞和PC12细胞,ELISA检测1μg/dmL脂多糖（LPS）作用BV-2细胞6、12、24 h后上清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的水平;MTT检测LPS与BV-2细胞共培养上清对PC12细胞存活率的影响,同时设对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组;MTT检测SIRT1激活剂藜芦醇（5、10、25、50、100μmol/L）、SIRT1抑制剂尼克酰胺（5、10、25、50mmol/L）对PC12细胞存活率的影响,以筛选二者的干预浓度。实验分对照组、LPS+BV-2细胞共培养上清液组、白藜芦醇干预组、尼克酰胺干预组,分别加入培养基、LPS+BV-2细胞共培养上清液、50μmol/L白藜芦醇、25 mmol/L尼克酰胺,培养18 h后MTT检测4组细胞存活率,Western blotting检测细胞内SIRT1、乙酰化p53的表达水平。结果 LPS作用BV-2细胞6、12、24 h后IL-6、TNF-α分泌量均依次增高,差异有统计学意义（P＜0.05）;MTT比色显示与对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组比较。LPS+BV-2细胞共培养上清组PC12细胞存活率下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;100μmol/L白藜芦醇组、50μmol/L尼克酰胺组细胞存活率较对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,因此选择50μmol/L白藜芦醇、25μmol/L尼克酰胺进行实验;与对照组比较,LPS+BV-2细胞共培养上清组细胞存活率降低,SIRT1的表达下降,乙酰化p53的表达上升,差异有统计学意义（P＜0.05）,与LPS与BV-2共培养上清组比较,白藜芦醇干预组细胞活性上升,SIRT1的表达水平较高,乙酰化p53的表达量较低,尼克酰胺干预组结果相反,细胞活性下降,SIRT1的表达较低,乙酰化p53的表达较高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在LPS与小胶质细胞共培养上清损伤多巴胺（DA）能神经元过程中,SIRT1具有保护作用,其机制与乙酰化p53受抑制有关。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2013年第11期||共页
作者
叶杰明; 刘振华; 谢惠芳; 魏继鹏; 陆伶俐; 黄燕君;
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作者单位

南方医科大学珠江医院神经内科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类神经病学;
关键词
沉默信息调控因子; 帕金森病; BV-2细胞; 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞; p53;

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