不同方法诱导大鼠脂肪基质细胞定向分化为神经细胞的比较研究

唐艳平; 姜晓丹; 张洪钿; 邹雨汐; 徐如祥

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目的探索提高大鼠脂肪基质细胞（ADSCs）向神经细胞定向诱导分化比例的实验方法。方法根据所采用的不同细胞诱导分化方法分为A组（直接诱导组:以含血清及神经营养因子的Neurobasal培养基直接诱导ADSCs向神经细胞分化）和B组[神经球诱导组:先以无血清Neurobasal培养基将ADSCs诱导为神经干细胞（NSCs）球,再以含血清及营养因子的Neurobasal培养基诱导神经球干细胞向神经细胞分化]。通过细胞形态学观察以及免疫细胞化学检测巢蛋白（nestin）、β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）、微管相关蛋白2（MAP2ab）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达,鉴定细胞分化结果。结果免疫细胞化学结果证实,两组细胞均有效表达nestin和β-tubulinⅢ。A组细胞在诱导6 h时nestin表达可达高峰（73.8%±6.5%）,并很快下降（24 h为50.3%±3.8%,72 h为10.5%±3.0%）,72 h后即检测不到;β-tubulinⅢ在诱导后24 h开始表达（33.5%±6.6%）,1周达高峰（84.3%±33%）。B组nestin的高表达持续整个神经球阶段,β-tubulinⅢ在神经球阶段有少量表达（成球后7 d为14.1%±3.3%）,神经球细胞分化后其表达明显增加（分化后3 d为46.4%±6.1%）;B组在由NSCs向神经细胞诱导一定时间后可检测到一定比例的MAP2ab阳性细胞（24.5%）。结论ADSCs在体外稳定扩增传代并在适宜诱导条件下,可以向神经细胞定向分化。应用神经球诱导法和直接诱导法均可得到较高比例的nestin及β-tubulinⅢ阳性细胞,神经球诱导组nestin表达稳定,并有一定比例MAP2ab阳性细胞出现。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2009年第8期||共页
作者
唐艳平; 姜晓丹; 张洪钿; 邹雨汐; 徐如祥;
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作者单位

广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤;
关键词
脂肪基质细胞; 细胞诱导; 细胞分化; 神经元样细胞;

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