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细胞外信号调节激酶对大鼠局灶性脑缺血后细胞周期调控的影响

         

摘要

目的研究脑缺血后细胞外信号调节激酶(ERKs)对细胞周期调控的影响。方法建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,分为脑缺血组(对照组及治疗组)和假手术组。治疗组于缺血前30 min尾静脉注入U0126溶液,对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白Dl(CyclinDl)和细胞周期蛋白E(CyclinE)阳性细胞表达;免疫印迹(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(pERK1/2)、CyclinDl和CyclinE的蛋白表达;半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)观察转录因子E2FmRNA的表达。结果治疗组CyclinDl和CyclinE阳性表达的细胞数较对照组显著减少(P<0.05);缺血对照组pERK1/2蛋白表达显著强于治疗组(P<0.05),4 h时间点表达最为明显,12 h时间点恢复到基线水平,CyclinDl和CyclinE表达6 h开始升高,12 h表达最为明显,治疗组较对照组显著减弱(P<0.05);缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于治疗组和假手术组(P<0.05),以7d表达最为明显。结论ERKs在大鼠脑缺血中发挥重要作用,抑制脑缺血引起的ERK1/2磷酸化,可降低细胞周期蛋白CyclinDl、CyclinE和E2F的表达,即ERKs可影响细胞周期的调控。

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