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人NR2B基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

         

摘要

目的克隆人NR2B基因,构建其真核表达载体,获得暂态表达NR2B的CHO细胞。方法RT-PCR方法克隆人NR2B基因,并插入真核表达载体pcDNA3.1中,将该重组载体转染至CHO细胞。通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光鉴定细胞中NR2B的表达,通过流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果成功获得人NR2B基因,转染的CHO细胞可检测到NR2B的表达,表达NR2B的CHO细胞并不会凋亡。结论成功克隆和构建了人NR2B基因的真核表达载体,并在CHO细胞中得到了表达。

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