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携带绿色荧光蛋白基因的APP695真核细胞表达载体的构建及鉴定

         

摘要

目的构建大鼠淀粉样前体蛋白(APP)695基因真核细胞荧光表达载体,进行细胞转染、表达,为阿尔茨海默病(AD)治疗药物的研究提供一种有效的细胞模型。方法设计并合成APP695基因的引物,以携带APP695基因的真核细胞表达载体pCB6质粒为模板,PCR扩增得到A PP695基因全序列;将APP695基因连接到携带绿色荧光蛋白基因的载体pIRES2-EGFP上;应用酶切分析、PCR检测及DNA测序分析等鉴定所构建的真核细胞表达载体。结果以重组载体为模板扩增得到的片段大小与已知A PP695基因大小相同,酶切也得到目的基因片段,测序结果显示与已知APP695基因序列相同。结论成功构建了携带绿色荧光蛋白基因的APP695基因真核细胞表达载体,为AD治疗药物的研究提供了一种有效的分子工具。

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