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兔骨髓基质细胞Feridex标记及体外MRI成像的实验研究

         

摘要

目的使用超顺磁性氧化铁菲立磁(FE)和转染试剂多聚赖氨酸(PLL)对骨髓基质细胞(BMSCs)进行体外标记,并在体外对标记细胞进行MRI示踪,确定其标记BMSCs的适宜浓度。方法使用不同浓度(10、25、50、75μg/mL)的FE复合PLL,形成FE-PLL并标记新西兰大白兔BMSCs后,分为5组(A:纯BMSCs组;B:5μg/mL FE+0.75μg/mL PLL组;C:12.5μg/mL FE+0.75μg/mL PLL组;D:25μg/mL FE+0.75μg/mL PLL组;E:37.5μg/mL FE+0.75μg/mL PLL组)。对各组细胞分别进行普鲁士蓝染色、流式细胞仪检测、透射电镜观察,检测FE-PLL标记兔BMSCs的效率及其对凋亡的影响。体外扫描采用4.7T MR机,扫描序列为轴面T2WI。结果FE可以高效率标记BMSCs,被标记的细胞显微镜下呈淡黄或深黄,颜色的深浅与所加FE的剂量呈正相关:胞质内散在分布许多含膜的囊泡样包涵体结构,囊泡内有浓聚细小的铁颗粒,从B组~E组依次增多。流式细胞仪结果显示,5、12.5、25μg/mL各组FE对细胞无不良影响,而37.5μg/mL组凋亡细胞明显增加。体外4.7T MRI显示未标记组无信号改变,呈显著高信号,标记组随FE浓度的增高信号改变增大,信号降低的越明显。结论FE可以用来体外标记兔BMSCs,在适宜浓度下对其生物学活性无明显影响,并能在MRI下达到示踪的目的。

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