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脐血源神经干细胞在SDF-1/CXCR4趋化下对脑出血大鼠神经损伤恢复的作用

         
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目的 探讨移植的脐血源神经干细胞（UCBNSCs）在基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/CXC趋化因子受体4（CXCR4）作用下对脑出血大鼠神经功能修复的影响。方法 （1）体外迁移实验中,将UCBNSCs置入Transwell小室的上室,在下室中分别加入0、30、60和120 ng/mL浓度的SDF-1。（2）体内实验中,将60只脑出血模型大鼠按照随机数字表法分为UCBNSCs移植组和对照组,每组30只。造模后2 d分别向2组大鼠颅内移植UCBNSCs悬液10 μL和等量的磷酸盐缓冲液（PBS）,同时腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记内源性神经干细胞。分别于移植后1 d、1周、2周对2组大鼠进行改良神经功能缺损评分（mNSS）。移植后2周处死全部大鼠,进行SDF-1、BrdU、血管内皮生长因子（VEGF）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及双肾上腺皮质激素（DCX）免疫荧光染色；同时采用转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记（TUNEL）检测试剂盒检验细胞凋亡情况。结果 （1）体外实验中,UCBNSCs中能够检测到CXCR4的表达；60 ng/mL SDF-1对UCBNSCs迁移作用最大,与其他浓度SDF-1比较,差异有统计学意义（P＆0.05）。（2）体外实验中,移植2周后,UCBNSCs组大鼠室管膜下区BrdU标记的细胞数量增多,BrdU/DCX、BrdU/GFAP细胞数量明显比对照组增多,差异有统计学意义（P＆0.05）；UCBNSCs移植组脑损伤区神经营养因子VEGF阳性细胞数[（88.30±7.21）个/视野]明显高于对照组[（53.20±4.45）个/视野],差异有统计学意义（t= 4.144,P=0.000）；UCBNSCs移植组脑损伤区凋亡细胞的数量[（34.30±2.44）个/视野]明显低于对照组[（47.70±1.98）个/视野],差异有统计学意义（t=4.266,P=0.001）。移植后2周时UCBNSCs组mNSS评分[（6.40±0.163）分]明显低于对照组[（7.50±0.17）分],差异有统计学意义（t=4.714,P=0.002）。结论 SDF-1/CXCR4可以趋化移植的UCBNSCs到达脑出血损伤区,促进大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与促进神经发生、VEGF的分泌和抑制细胞凋亡有关。

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