长链非编码RNA CRNDE对胶质瘤干细胞特性改变的影响及其机制

王耿焕; 沈和平; 黄嬛; 蒋小红; 陈鹏

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目的探讨长链非编码RNA CRNDE对胶质瘤干细胞特性改变的影响及其机制。方法应用免疫磁珠法从人胶质瘤细胞系U251中分离出CD133+U251干细胞（U251s）。将实验细胞分为U251s组、U251s-CRNDE组及U251组、U251-CRNDE组,其中U251s-CRNDE组、U251-CRNDE组细胞预先用CRNDE短发夹RNA（shRNA）慢病毒载体转染以下调CRNDE的表达。应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组细胞中CRNDE mRNA的表达水平,应用细胞计数试剂（CCK）-8法检测各组细胞的增殖变化,应用Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭能力,应用划痕实验检测各组细胞的迁移能力,应用平板克隆实验检测各组细胞的克隆形成能力,应用流式细胞术检测各组细胞的周期改变,应用Western blotting法检测U251s组、U251s-CRNDE组细胞中干细胞标志蛋白A2B5、CD133、巢蛋白、Sox2、Oct-4、Nanog以及磷脂酰肌醇激酶（PI3K）-蛋白激酶B（AKT）-雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路关键蛋白PI3K、AKT、磷酸化（p）-AKT、mTOR蛋白的表达水平。结果与U251组相比,U251s组细胞中CRNDE mRNA的表达水平明显升高,差异有统计学意义（P＆0.05）。U251s-CRNDE组与U251s组细胞相比,U251-CRNDE组与U251组细胞相比,前者的细胞增殖率、穿膜细胞数量、细胞迁移率、细胞集落形成数目、G2/M期细胞比例明显降低,G1/G0期细胞比例明显升高,差异均有统计学意义（P＆0.05）。与U251s组相比,U251s-CRNDE组细胞中CD133、巢蛋白、Sox2、Oct-4及PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白的表达水平明显降低,差异均有统计学意义（P＆0.05）。结论 CRNDE在胶质瘤干细胞中表达增高,而下调CRNDE的表达后可以抑制胶质瘤干细胞的特性,且这种影响与PI3K-AKT-mTOR信号通路的调控有关。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2021年第2期||共页
作者
王耿焕; 沈和平; 黄嬛; 蒋小红; 陈鹏;
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正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
神经胶质瘤; 长链非编码RNA; CRNDE; 肿瘤干细胞; 干细胞特性;

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