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槲皮素对子宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制

         

摘要

目的观察中药槲皮素对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制及促凋亡作用,并对其机制进行初步探讨。方法不同浓度(分别为6.25、12.5、25、50μmol/L)槲皮素作用24 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其对HeLa细胞生长的抑制作用,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色流式细胞术检测槲皮素作用24 h后HeLa细胞凋亡率的变化。建立宫颈癌裸鼠模型并检测腹腔注射不同浓度槲皮素(分别为25、50、100 mg·kg-1·d-1)15 d后荷瘤裸鼠的抑瘤率。采用激光共聚焦荧光显微镜结合Ca2+荧光探针——Fluo-3/AM和荧光探针——JC—1,分别检测槲皮素作用后HeLa细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)浓度和线粒体膜电位的改变,并通过MTT比色法榆测HeLa细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性的变化。结果6.25、12.5、25、50μmol/L的槲皮素作用24 h后,HeLa细胞生长的抑制率分别为(13.4±2.2)%、(26.2±6.8)%、(39.8±11.4)%、(48.5±9.1)%,凋亡率分别为(9.0±1.4)%、(13.3±1.1)%、(22.5±2.3)%、(44.7±4.2)%,其生长抑制率和凋亡率均呈明显的浓度依赖关系(P<0.01)。25、50、100 mg·kg-1·d-1的槲皮素对裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为13.4%、30.4%和45.8%。随着槲皮素浓度的增加,HeLa细胞内线粒体膜电佗降低、[Ca2+]i浓度升高、caspase-3活性增强,且均呈明显的浓度依赖关系(P<0.01)。结论槲皮素能明显抑制宫颈癌HeLa细胞的生长;槲皮素可能通过激活细胞内Ca2+信号传导通路,最终通过线粒体途径,诱导宫颈细胞的凋亡。

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