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普罗布考对高糖培养人视网膜Müller细胞特化蛋白1/细胞骨架相关蛋白／核因子E2相关因子2/半胱氨酸连接酶催化亚基表达的影响

         
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目的 观察普罗布考对高糖环境下人视网膜Müller细胞中特化蛋白1 （SP1）／细胞骨架相关蛋白（Keap1 ）／核因子E2相关因子2 （Nrf2 ）／半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）表达的影响；初步探讨普罗布考的抗氧化作用。方法 体外培养的人Müller细胞分为正常糖组（5.5 mmol/L ）、高糖组（25.0 mmol/L）、正常糖+普罗布考组、高糖+普罗布考组；后两组中加入100 μmol/L普罗布考。免疫荧光染色法鉴定Müller细胞；免疫荧光染色法和实时RP-PCR （qRT-PCR）检测各组Müller细胞中SP1、Keap1、Nrf2、GCLC蛋白、mRNA的表达。两组间数据比较采用独立样本t检验。结果 体外培养的人Müller细胞谷氨酰胺合成酶染色阳性率＆95%。免疫荧光染色结果显示,Müller细胞中SP1、Keap1、Nrf2、GCLC蛋白均呈阳性表达。qRT-PCR结果显示,与正常糖组比较,高糖组Müller细胞中SP1 （t=28.30,P＆0.000）、Keap1 （t=5.369,P=0.006 ）、Nrf2 （t=10.59,P=0.001）mRNA表达显著上调,GCLC显著下调（t=4.633,P=0.010）,差异均有统计学意义。与高糖组比较,高糖＋普罗布考组Müller细胞中SP1 （t=12.60,P=0.000）、Keap1 （t=4.076,P=0.015 ）mRNA表达显著下调,Nrf2 （t=12.90,P=0.000）、GCLC （t=15.96,P＆0.000）mRNA表达显著上调,差异均有统计学意义。结论 普罗布考通过抑制高糖诱导Müller细胞中SP1、Keap1的表达,上调Müller细胞中Nrf2、GCLC的表达,发挥抗氧化作用。

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