人单核细胞共刺激分子在异种免疫反应中的表达及其作用机制

方玉松; 刘子栋; 朱良明; 王璞; 汪运山; 徐何

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目的揭示人单核细胞共刺激分子在异种免疫反应中的表达及其作用机制。方法从猪的主动脉分离血管内皮细胞（PEC）并培养扩增;从人单个核细胞（PBMC）中纯化 CD4+T 淋巴细胞和单核细胞。建立 PEC 和人 PBMC 混合培养体系,培养后收集细胞,然后加入荧光标记的单克隆抗体,通过流式细胞术检测 CD14+单核细胞表面共刺激分子表达情况。为了检测淋巴细胞增殖反应以及阻断共刺激分子对 PEC 免疫反应的作用,在 PEC 和人 PBMC 混合培养体系中分别加入抗 CD154、CD80和 CD86单克隆抗体,在培养的最后24 h 加入同位素,于培养结束后收集细胞并经同位素计数仪进行检测。纯化的单核细胞经 PEC 刺激后与 CD4+T 淋巴细胞共培养来研究这些单核细胞诱导CD4+T 淋巴细胞的增殖以及阻断共刺激分子的作用。结果 PEC 和人 PBMC 混合培养后可检测到PBMC 对异种 PEC 的高度免疫增殖反应;流式细胞术检测到 PBMC 中的 CD14+单核细胞表面无CD40和 CD80的表达,但表达 CD86,经 PEC 刺激后,CD14+单核细胞膜表面显著上调 CD40和 CD80蛋白分子的表达,CD86表达上调。与未经刺激的单核细胞相比较,经 PEC 刺激后的单核细胞和CD4+T 淋巴细胞共培养后可诱导 CD4+T 淋巴细胞明显增殖,抗人 CD154、CD80、CD86单克隆抗体可以阻断 CD4+T 淋巴细胞对 PEC 的增殖反应。结论人 CD14+单核细胞在异种免疫反应过程的间接抗原提呈和共刺激信号传导中发挥重要作用,通过上调其共刺激分子的表达与 CD4+T 淋巴细胞共刺激分子 CD154和 CD28相互作用形成第二信号,并诱导 CD4+T 淋巴细胞对 PEC 的增殖反应;阻断共刺激分子可抑制异种细胞免疫反应。

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来源
《中华器官移植杂志》 |2008年第10期||共页
作者
方玉松; 刘子栋; 朱良明; 王璞; 汪运山; 徐何;
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作者单位

1. 山东大学附属济南市中心医院移植科 2. 山东大学附属济南市中心医院移植免疫研究室;

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正文语种 chi
中图分类筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤;
关键词
单核细胞; CD4阳性 T淋巴细胞; 内皮细胞; 移植; 异种;

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