FNDC5基因过表达或沉默对动脉粥样硬化斑块形成中焦亡相关因子的影响及机制研究

龚才伟; 王尧; 刘大男; 欧航君; 赵权威; 李辉; 李芸芸; 陈龙

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目的:探索含Ⅲ型纤连蛋白结构域蛋白5(FNDC5)基因过表达或沉默对高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化斑块形成中焦亡相关因子的影响及其机制。方法:建立ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型;构建FNDC5基因过表达或沉默载体并转染动物模型,分组干预;采用酶法检测血清脂质含量;主动脉行油红O染色、HE染色和Masson染色检测斑块面积;采用免疫组化检测主动脉壁FNDC5、磷酸化核因子κB(pNF-κB)p65、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、caspase-1和消皮素D N端片段(GSDMD-N)的定位表达;采用TUNEL+caspase-1荧光双染检测主动脉壁细胞焦亡及其特征;采用ELISA法检测主动脉组织乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用RT-qPCR和Western blot分别检测主动脉组织FNDC5、NLRP3、NF-κB p65、cleaved caspase-1、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、GSDMD-N、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的mRNA及蛋白表达水平。结果:成功构建FNDC5腺病毒过表达和沉默载体。过表达FNDC5降低高脂饮食喂养的ApoE^(-/-)小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平,减少主动脉斑块面积,降低内膜/中膜比值,降低主动脉LDH活性,降低主动脉NF-κB p65、NLRP3、cleaved caspase-1、ASC、GSDMD-N、IL-1β和IL-18的mRNA及蛋白表达水平,减少细胞焦亡(P<0.05);而沉默FNDC5基因使高脂饮食喂养的ApoE^(-/-)小鼠呈现相反的结果(P<0.05)。结论:FNDC5可调控动脉粥样硬化进程中的细胞焦亡,其机制可能是:通过降低NF-κB活性和表达,抑制NLRP3激活及降低其下游焦亡信号通路相关因子caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18表达,抑制细胞焦亡,从而延缓动脉粥样硬化斑块形成。

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来源
《中国病理生理杂志》 |2023年第6期|961-972|共12页
作者
龚才伟; 王尧; 刘大男; 欧航君; 赵权威; 李辉; 李芸芸; 陈龙;
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作者单位

贵州医科大学附属医院心内科;

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正文语种 chi
中图分类冠状动脉（粥样）硬化性心脏病（冠心病）;发病学;
关键词
动脉粥样硬化; 含Ⅲ型纤连蛋白结构域蛋白5; 鸢尾素; 细胞焦亡;

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