固定与透膜方法对免疫荧光检测肝脏冷冻切片中胰岛素的影响

张杰; 陆仲夏; 李欣宇; 刘路馨; 路新枝

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固定与透膜方法对免疫荧光检测肝脏冷冻切片中胰岛素的影响

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目的:探讨不同的固定与透膜方法对免疫荧光检测小鼠肝脏冷冻切片中胰岛素的影响,为研究胰岛素在肝脏中的代谢及胰岛素与其他分子的相互作用提供技术支持。方法:采用切片前固定或切片后固定,制作小鼠肝脏组织冷冻切片。通过间接免疫荧光技术检测5种固定与透膜方案对小鼠肝脏组织冷冻切片中胰岛素荧光染色的影响。结果:(1)方案1采用4%多聚甲醛固定联合0.5%Triton X-100透膜检测,肝血窦和肝索结构清晰,胰岛素荧光信号主要分布于细胞质膜和细胞质;(2)方案2采用4%多聚甲醛固定联合0.5%saponin透膜检测,肝血窦和肝索结构清晰,切片整体的荧光信号非常微弱,且荧光信号主要分布于细胞质膜附近;(3)方案3采用丙酮一步固定与透膜检测,肝血窦不清晰,部分肝细胞出现肿胀,胰岛素荧光信号主要分布于细胞质膜附近;(4)方案4采用甲醇一步固定与透膜检测,肝血窦不清晰,细胞间界限模糊,胰岛素荧光信号出现明显的核易位;(5)方案5采用4%多聚甲醛(含5%冰醋酸)一步固定与透膜检测,肝血窦和肝索结构清晰,胰岛素荧光信号主要分布于细胞质膜和细胞质。结论:方案1和5适于肝脏冷冻切片中胰岛素的检测。

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来源
《中国病理生理杂志》 |2023年第9期|1716-1723|共8页
作者
张杰; 陆仲夏; 李欣宇; 刘路馨; 路新枝;
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作者单位

中国海洋大学医药学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类糖尿病;病理生理学;
关键词
胰岛素; 肝脏; 固定; 透膜; 冷冻切片; 免疫荧光;

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