WT1异构体比例转变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响

徐菁; 覃艳红; 张翠明; 乔爱秀; 李灵敏; 王宏伟

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WT1异构体比例转变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响

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目的:探讨WT1异构体比例改变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响.方法:逆转录获得人WT1(17AA-/KTS-)异构体全长cDNA序列,连接到PCDH1-MCS1-EF1-copGFP慢病毒质粒载体上,酶切和测序证实正确构建重组质粒,建立WT1异构体表达比例改变的单克隆细胞株.MTT法检测细胞增殖活性,形态学观察及Annexin Ⅴ检测细胞凋亡.结果:成功构建了真核表达载体PCDH1-MCS1-EF1-copGFP-WT1(17AA-/KTS-),转染HL-60细胞后,实时荧光定量RT-PCR和Western blotting显示重组质粒转染细胞中WT1(17AA-/KTS-)mRNA和蛋白水平明显高于空质粒转染组和正常对照组.重组质粒转染细胞的生长抑制率高于空质粒转染组和正常对照组,差异显著(P＜0.05).加2 μmol/L三氧化二砷(As2O3)培养48h后,形态学观察发现3组细胞都出现了凋亡形态,但重组质粒转染细胞更为明显.流式细胞术结果显示,As2O3作用24h后,重组质粒转染细胞凋亡率较空质粒转染组和正常对照组细胞升高,差异显著(P＜0.05).结论:增加外源性WT1(17AA-/KTS-)异构体的表达能抑制HL-60细胞增殖,促进As2O3诱导的细胞凋亡.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2013年第5期|923-927|共5页
作者
徐菁; 覃艳红; 张翠明; 乔爱秀; 李灵敏; 王宏伟;
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作者单位

山西医科大学病理教研室,山西太原 030001;

山西医科大学第二医院血液病研究所,山西太原 030001;

山西医科大学第二医院超声诊断科,山西太原 030001;

山西医科大学病理教研室,山西太原 030001;

山西医科大学病理教研室,山西太原 030001;

山西医科大学第二医院血液病研究所,山西太原 030001;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
WT1蛋白; 蛋白异构体; 白血病; 细胞凋亡;

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