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小檗胺诱导K562细胞凋亡及其与bcr/abl gene及P210表达的关系

         

摘要

目的:探讨小檗胺(BER)诱导K562细胞凋亡及其可能的机制.方法:以流式细胞仪(FCM)分析、电镜观察细胞微结构变化及基因组DNA电泳等方法检测细胞凋亡.以RT-PCR及Westem blot方法检测K562细胞BCR/ABL mRNA和蛋白质水平表达.结果:FCM检测见到典型的凋亡峰,8.0 mg/L BER作用24-72 h,随药物作用时间延长,细胞凋亡率由(29.20±3.82)%上升至(61.77±4.35)%(P<0.01);以2.0-8.0 mg/L BER作用24h,随药物浓度增加,K562细胞的凋亡率也增加.电镜下可见明确的细胞凋亡的形态学改变.DNA电泳呈现典型的梯形条带.16.0 mg/L BER处理24h,K562细胞bcr/abl mRNA相对表达量及BCR/ABL融合蛋白质P210水平均明显低于对照组,分别为0.73±0.02vs1.19±0.02(P<0.01)和0.63±0.01vs1.04±0.02(P<0.01),呈时间-浓度依赖效应.经BER作用后,K562细胞bcr/abl mRNA表达强度与P210水平呈正相关(r=0.928,P<0.05),且细胞凋亡率与bcr/abl mRNA表达呈负相关(r=-0.997,P<0.01).结论:在体外BER对K562细胞有明显的促凋亡作用,抑制bcr/ablmRNA表达及其蛋白质水平可能是其作用的重要机制之一.

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