人β地中海贫血IVSⅡ654(C→T)突变基因的克隆和真核表达体系的构建

段山; 方小武; 陈路明; 曾瑞萍; 杜传书

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目的: 克隆人β地中海贫血IVSII654突变基因,构建该致病基因的体外真核表达体系.为该病基因治疗的研究提供理想模型.方法: 抽提β 654纯合子患者DNA进行PCR扩增,将其克隆到pBGT51质粒中,然后将人β珠蛋白基因座控制区(LCR)及β 654基因亚克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3.1+中.脂质体转染至小鼠红白血病细胞(MEL),DMSO诱导MEL细胞表达,逆转录PCR检测人β 654基因在MEL中的表达.结果: 成功构建了几乎真实模拟人体内β 654基因调控的真核表达系统.结论: β 654基因在MEL细胞中的表达情况同人体内β 654基因的表达完全一致,为该病的基因治疗研究提供了一个理想模型.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2003年第1期|22-26|共5页
作者
段山; 方小武; 陈路明; 曾瑞萍; 杜传书;
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作者单位

中山大学中山医学院医学遗传学教研室,广东,广州,510089;

中山大学中山医学院医学遗传学教研室,广东,广州,510089;

中山大学中山医学院医学遗传学教研室,广东,广州,510089;

中山大学中山医学院医学遗传学教研室,广东,广州,510089;

中山大学中山医学院医学遗传学教研室,广东,广州,510089;

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正文语种 chi
中图分类先天性溶血性贫血;
关键词
贫血,珠蛋白生成障碍性; βIVSII654突变基因; 基因疗法; 白血病,幼红细胞,急性;

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