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反义 bcl-2 硫代磷酸寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的抑制作用及诱导细胞凋亡的研究

         

摘要

目的: 观察反义 bcl-2 硫代磷酸寡脱氧核苷酸(AS-PS-ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H446 mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响.方法: 合成bcl-2 AS-PS-ODN 作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H446,半定量RT-PCR检测bcl-2 mRNA表达;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Bcl-2蛋白表达;通过克隆形成率、细胞计数、流式细胞仪DNA倍体分析、TUNEL等指标观察bcl-2 AS-PS-ODN对细胞增殖、活力和凋亡的影响. 结果: ① bcl-2 AS-PS-ODN能特异性地降低 NCI-H446细胞bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白的表达.1 μmol/L AS-PS-ODN作用24 h后bcl-2 mRNA表达量下降69.5%, 48 h后Bcl-2蛋白下降62.7% .② bcl-2 AS-PS-ODN能够抑制细胞增殖和活力,诱导细胞凋亡, 1 μmol/L AS-PS-ODN作用24 h后, 细胞凋亡率约为22.3%-32.7%.结论: bcl-2 AS-PS-ODN能够特异性降低bcl-2 mRNA、蛋白表达,抑制 NCI-H446细胞的增殖和活力,并诱导细胞凋亡.

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